Kit Isolasi DNA Jaringan Hewan DE-05011/05012/05013 Untuk Pemurnian DNA Genomik

Kit Isolasi DNA Jaringan Hewan Cat.No.DE-05011/05012/05013 Untuk Pemurnian DNA Genomik Dari Sel Kultur Dan Hewan

Jaringan HewanKit Isolasi DNA

Cat.No.DE-0501/05012/05013

Untuk pemurnian DNA genomik dari sel yang dikultur dan jaringan hewan

Deskripsi Produk:

Kit ini menggunakan kolom khusus DNA yang secara khusus dapat mengikat DNA, Foregene protease dan sistem buffer yang unik.DNA genomik berkualitas tinggi dapat diekstraksi dari berbagai sel kultur dan jaringan hewan dalam waktu 30 hingga 50 menit.

Membran gel silika hanya DNA yang digunakan dalam kolom spin adalah bahan baru Foregene yang unik, yang dapat secara efektif dan spesifik mengikat DNA, dan memaksimalkan penghilangan RNA, protein pengotor, ion, dan senyawa organik lainnya dalam sel.5-80μg DNA genomik berkualitas tinggi dapat dimurnikan dari jaringan 10-50mg.

Komponen produk:

Fitur & keuntungan:

-Tidak ada kontaminasi RNase: Kolom Hanya-DNA yang disediakan dalam kit memungkinkan untuk menghilangkan RNA dari DNA genom tanpa RNase tambahan selama percobaan, sehingga mencegah laboratorium terkontaminasi oleh RNase eksogen.

-Kecepatan cepat: Foregene Protease memiliki aktivitas lebih tinggi daripada protease serupa dan mencerna sampel jaringan lebih cepat;

-Sederhana: operasi pemurnian DNA genom dapat diselesaikan dalam 50 menit.

-Nyaman: Sentrifugasi dilakukan pada suhu kamar, sentrifugasi 4℃ dan presipitasi etanol DNA tidak diperlukan.

-Keamanan: tidak ada reagen organik yang digunakan.

-Kualitas tinggi: DNA genom yang dimurnikan memiliki fragmen besar, tanpa RNA, tanpa RNase, dan kandungan ion yang sangat rendah, yang dapat memenuhi persyaratan berbagai eksperimen.

Aplikasi DNA genom:

DNA genom yang dimurnikan oleh Kit Isolasi DNA Jaringan Hewan memiliki kemurnian tinggi dan dapat digunakan untuk operasi biologi molekuler rutin, seperti: pencernaan enzim, PCR, hibridisasi Selatan, konstruksi perpustakaan, dan eksperimen lainnya.

Kontrol Kualitas Produk:

Sesuai dengan Sistem Manajemen Mutu Total FOREGENE, setiap batch kit isolasi DNA jaringan hewan diuji secara ketat beberapa kali untuk memastikan keandalan dan stabilitas kualitas setiap batch kit.

Hasil dan kemurnian ekstraksi DNA genom:

Hasil ekstraksi DNA genom jaringan hewan terkait dengan sumber jaringan, kondisi penyimpanan, waktu penyimpanan, dosis dan faktor lainnya.Kemurnian DNA genom yang diperoleh memenuhi operasi eksperimental biologi molekuler rutin, dan OD260/280-nya adalah antara 1,7-1,9.Hasil ekstraksi DNA genom menggunakan kit ini ditunjukkan pada tabel berikut:

Tindakan pencegahan:(Pastikan untuk membaca tindakan pencegahan dengan seksama sebelum menggunakan kit)

- Sampel harus menghindari pembekuan dan pencairan berulang, jika tidak, fragmen DNA yang diekstraksi akan lebih kecil dan hasil ekstraksi akan berkurang.

- Sebelum menggunakan kit, hati-hati memeriksa apakah ada curah hujan di Buffer L1, Buffer L2 dan Buffer PW.Jika ada presipitasi, harap larutkan pada suhu 37℃, aduk rata sebelum digunakan.

- Sebelum menggunakan kit, pastikan untuk memeriksa apakah Buffer WB ditambahkan dengan etanol anhidrat sesuai petunjuk.Buffer WB ditambahkan dengan 60ml etanol anhidrat (DE-05011), 120ml etanol anhidrat (DE-05012) dan 300ml etanol anhidrat (DE-053013) sebelum digunakan.

- Volume elusi: Buffer EB tidak boleh kurang dari 100μl, jika tidak maka akan mempengaruhi hasil DNA.

- Ingatlah untuk tidak menambahkan RNase ke Buffer apa pun.

- Semua langkah sentrifugasi disentrifugasi pada suhu kamar (15-25℃) menggunakan desktop centrifuge.

- Semua langkah percobaan dilakukan pada suhu kamar (15-25℃).

Penyimpanan dan Umur simpan:

- Kit dapat disimpan selama 12 bulan pada suhu kamar (15-25 ), atau 2-8 untuk waktu yang lebih lama.

Catatan: Jika disimpan pada suhu rendah, larutan ini rentan terhadap presipitasi.Sebelum digunakan, pastikan untuk menempatkan larutan dalam kit pada suhu kamar untuk jangka waktu tertentu.Jika perlu, panaskan dalam penangas air 37℃ selama 10 menit untuk melarutkan endapan, dan campur sebelum digunakan.

- Larutan Foregene Protease memiliki formula unik dan aktif dalam waktu lama (3 bulan) pada suhu kamar;aktivitas dan stabilitasnya akan lebih baik bila disimpan pada suhu 4℃, sehingga disarankan untuk menyimpannya pada suhu 4℃, ingat untuk tidak menyimpannya pada suhu -20℃ simpan.

Kolom Hanya-DNAkarakter

*:Sistem elusi minimum 100μl adalah volume yang direkomendasikan yang masuk akal yang diberikan dengan mempertimbangkan tingkat dan konsentrasi pemulihan DNA.Jika untuk meningkatkan hasil DNA, volume eluat dapat ditingkatkan dengan tepat;jika untuk meningkatkan konsentrasi DNA yang dimurnikan, volume eluat dapat dikurangi dengan tepat dengan alasan mengorbankan sebagian hasil DNA, seperti menggunakan sistem elusi 50μl, untuk mendapatkan konsentrasi DNA yang lebih tinggi.

Hasil dan kemurnian ekstraksi DNA genom

Hasil ekstraksi DNA genom jaringan hewan terkait dengan sumber jaringan, kondisi penyimpanan, waktu penyimpanan, dosis dan faktor lainnya.Kemurnian DNA genom yang diperoleh memenuhi operasi eksperimental biologi molekuler rutin, dan OD260/280-nya adalah antara 1,7-1,9.Hasil ekstraksi DNA genom menggunakan kit ini ditunjukkan pada tabel berikut:

Catatan: Data dalam tabel ini hanya untuk referensi.Dalam operasi sebenarnya, data yang diperoleh akan sedikit berbeda dari data dalam tabel ini karena faktor-faktor seperti kondisi penyimpanan dan kemampuan pengoperasian bahan yang digunakan.

alur kerja

Panduan Analisis Masalah

Berikut ini adalah analisis masalah yang mungkin dihadapi dalam ekstraksi DNA genom dari sampel jaringan, dengan harapan dapat membantu eksperimen Anda.Selain itu, untuk masalah eksperimental atau teknis lainnya selain instruksi operasi dan analisis masalah, kami telah mendedikasikan dukungan teknis untuk membantu Anda.Jika Anda memiliki kebutuhan, silakan hubungi kami: 028-83360257 atau E-mali: Tech@foregene.com.

Hasil rendah atau tidak ada DNA

Biasanya ada beberapa faktor yang mempengaruhi hasil DNA genom, termasuk sumber sampel, kondisi penyimpanan sampel, perlakuan awal sampel, manipulasi, dll.

DNA genom tidak dapat diperoleh selama ekstraksi

1. Sampel jaringan tidak disimpan dengan benar atau disimpan terlalu lama, mengakibatkan degradasi DNA genom.

Rekomendasi: Simpan sampel jaringan dalam nitrogen cair atau -80 °C;mencoba menggunakan sampel jaringan yang baru dikumpulkan untuk ekstraksi DNA genom.

2. Konsumsi jaringan yang terlalu sedikit dapat menyebabkan kegagalan untuk mengekstrak DNA genom yang sesuai.

Saran: Untuk sampel jaringan yang telah lama disimpan atau mengalami degradasi DNA genom yang parah, jumlah sampel jaringan dapat ditingkatkan secara tepat untuk mengekstraksi DNA genom yang cukup besar.Jumlah sampel dapat ditentukan sesuai dengan kebutuhan DNA, tetapi tidak boleh melebihi 50mg.

3. Penyimpanan Foregene Protease yang tidak tepat menyebabkan aktivitas berkurang atau tidak aktif.

Rekomendasi: Konfirmasikan kondisi penyimpanan Foregene Protease atau ganti dengan Foregene Protease baru untuk hidrolisis enzimatik.

4. Kit tidak disimpan dengan benar atau disimpan terlalu lama, menyebabkan beberapa komponen dalam kit rusak.

Rekomendasi: Beli kit ekstraksi DNA genomik jaringan hewan baru untuk operasi terkait.

5. Penggunaan kit yang tidak tepat.Misalnya, beberapa jaringan membutuhkan kit khusus untuk diproses.

Rekomendasi: Membeli kit untuk sampel, seperti ekstraksi DNA genom tanah, memerlukan pembelian Kit Isolasi DNA Tanah khusus.

6. Buffer WB tanpa menambahkan etanol anhidrat.

Rekomendasi: Pastikan untuk menambahkan volume etanol anhidrat yang benar ke Buffer WB.

7. Eluen tidak diteteskan ke membran silika dengan baik.

Saran: Tambahkan eluen yang telah dipanaskan sebelumnya pada suhu 65°C tetes demi tetes ke tengah membran silika gel, dan biarkan pada suhu kamar selama 5 menit untuk meningkatkan efisiensi elusi.

DiekstrakDNA genomdengan hasil rendah

1. Sampel tidak disimpan dengan benar atau disimpan terlalu lama, mengakibatkan degradasi DNA genom.

Rekomendasi: Simpan sampel jaringan dalam nitrogen cair atau -80;mencoba menggunakan sampel jaringan yang baru dikumpulkan untuk ekstraksi DNA genom.

2. Jika jumlah sampel jaringan terlalu kecil, DNA genom yang diekstraksi akan lebih sedikit.

Saran: Untuk sampel jaringan yang telah lama disimpan atau mengalami degradasi DNA genom yang parah, jumlah sampel jaringan dapat ditingkatkan secara tepat untuk mendapatkan DNA genom yang cukup banyak.Jumlah sampel dapat ditentukan sesuai dengan kebutuhan DNA, tetapi tidak boleh melebihi 50mg.

3. Jumlah sampel yang berlebihan akan menyebabkan pencernaan yang tidak lengkap dan sentrifugasi yang tidak lengkap.Kolom pemurnian dapat diblokir selama sentrifugasi pada kolom, dan DNA genom yang diekstraksi akan lebih sedikit.

Saran: Menurut jaringan yang berbeda, dosis harus disesuaikan dalam 10-50 mg.Ketika pencernaan tidak lengkap atau kolom pemurnian tersumbat, harap kurangi dosis jaringan yang sesuai.

4. Sampel tidak diproses sebelumnya atau diproses sebelumnya secara tidak lengkap.

Saran: Sampel yang diawetkan secara khusus atau beberapa sampel yang relatif khusus harus diberi perlakuan terlebih dahulu sebelum hidrolisis enzimatik, yang dapat menghilangkan larutan pengawet sampel atau faktor-faktor yang mempengaruhi aktivitas protease, sehingga reaksi hidrolisis enzimatik dapat dilakukan lebih teliti, dan DNA genomik hasil lebih tinggi dapat diperoleh diperoleh.

5. Sampel jaringan khusus yang diawetkan, seperti parafin tertanam, ekor tikus, dll.

Rekomendasi: Beli kit ekstraksi DNA genom khusus, seperti sampel tertanam parafin, Anda dapat memilih Kit Isolasi DNA FFPE;sampel ekor tikus, Anda dapat memilih Kit Mini DNA Ekor Tikus.Jaringan ini diperlakukan dengan kit khusus mereka, dan hasil ekstraksi DNA akan lebih tinggi dan efeknya akan lebih ideal.

6. Penyimpanan Foregene Protease yang tidak tepat menyebabkan aktivitas berkurang atau tidak aktif.

Rekomendasi: Konfirmasikan kondisi penyimpanan Foregene Protease atau ganti dengan Foregene Protease baru untuk hidrolisis enzimatik.

7. Masalah eluen.

Rekomendasi: Silakan gunakan Buffer EB untuk elusi;jika menggunakan ddH₂O atau eluen lainnya, pastikan pH eluen antara 7,0-8,5.

8. Eluen tidak ditambahkan tetes demi tetes dengan benar.

Saran: Tambahkan tetesan elusi ke tengah membran silika dan biarkan pada suhu kamar selama 5 menit untuk meningkatkan efisiensi elusi.

9. Volume eluen terlalu rendah.

Saran: Gunakan eluen untuk elusi DNA genom sesuai petunjuk, minimal tidak kurang dari 100μl.

DNA genomik yang diekstraksi dengan kemurnian rendah

Kemurnian DNA genom yang rendah akan menyebabkan kegagalan atau efek tidak memuaskan dari eksperimen hilir, seperti: enzim tidak dapat dipotong, dan fragmen gen target tidak dapat diperoleh dengan PCR.

1. Kontaminasi protein lain-lain, kontaminasi RNA.

Analisis: Buffer PW tidak digunakan untuk mencuci kolom;Buffer PW tidak digunakan untuk mencuci kolom pada kecepatan sentrifugasi yang benar.

Rekomendasi: Cobalah untuk memastikan bahwa tidak ada pengendapan di supernatan ketika supernatan dilewatkan melalui kolom;pastikan untuk mencuci kolom pemurnian dengan Buffer PW sesuai dengan instruksi, dan langkah ini tidak dapat diabaikan.

2. Polusi ion pengotor.

Analisis: Kolom pencuci Buffer WB dihilangkan atau hanya dicuci sekali, mengakibatkan kontaminasi ion sisa.

Rekomendasi: Pastikan untuk mencuci dua kali dengan Buffer WB sesuai petunjuk untuk menghilangkan ion sisa sebanyak mungkin.

3. Kontaminasi RNase.

Analisis: RNase eksogen ditambahkan ke Buffer;Operasi pencucian Buffer PW yang salah menghasilkan residu RNase, yang mempengaruhi operasi eksperimental RNA hilir, seperti transkripsi in vitro.

Saran: Kit ekstraksi asam nukleat seri forogen dapat menghilangkan RNA tanpa tambahan RNase, dan semua reagen dalam Kit Isolasi DNA Jaringan Hewan tidak memerlukan RNase;pastikan untuk mencuci kolom pemurnian dengan Buffer PW sesuai dengan instruksi, dan langkah ini tidak dapat diabaikan.

4. Residu etanol.

Analisis: Setelah kolom pemurnian dicuci dengan Buffer WB, tidak dilakukan sentrifugasi tabung kosong.

Rekomendasi: Ikuti instruksi untuk sentrifugasi tabung kosong yang benar.

5. Polusi kotoran lainnya.

Analisis: Sampel yang disimpan atau sampel khusus tidak diproses sebelumnya.

Rekomendasi: Perlakukan sampel secara menyeluruh sesuai dengan petunjuk pengoperasian.