Kit PCR Langsung Jaringan Hewan Reagen Lab Melakukan PCR Langsung Dari Jaringan Hewan

reagen lab Kit PCR Jaringan Hewan Langsung melakukan PCR langsung dari jaringan hewan tanpa pemurnian DNA sebelumnya

Deskripsi Produk

Kit PCR Langsung Jaringan Hewan menggunakan sistem buffer lisis yang unik untuk melepaskan DNA genom dengan cepat dari sampel jaringan hewan untuk reaksi PCR, sehingga sangat cocok untuk pengujian genetik skala besar.

Proses pelepasan DNA genom dari buffer lisis selesai dalam waktu 10-30 menit pada suhu 65°C, dan jumlah jejak DNA yang dilepaskan dapat digunakan sebagai cetakan untuk reaksi PCR tanpa proses lain seperti penghilangan protein dan penghilangan RNA.

2 × PCR Mudah^TMMix memiliki ketahanan yang kuat terhadap inhibitor reaksi PCR, dan dapat menggunakan lisat sampel yang akan diuji sebagai template untuk amplifikasi yang efisien dan spesifik.Reagen ini mengandung Forgene D-Taq DNAPolymerase, dNTPs, MgCl₂, buffer reaksi, pengoptimal PCR, dan stabilizer.Ini dapat digunakan dalam kombinasi dengan buffer lisis untuk mendeteksi sampel dengan cepat dan mudah, dan memiliki karakteristik sensitivitas tinggi, spesifisitas kuat, dan stabilitas yang baik.

D-Taq DNA polimerase adalah DNA polimerase yang dikembangkan khusus oleh Foregene untuk reaksi PCR langsung.

D-Taq DNA polimerase memiliki toleransi yang kuat terhadap berbagai penghambat reaksi PCR, dan dapat secara efisien mengamplifikasi sejumlah kecil DNA dalam berbagai sistem reaksi yang kompleks.Kecepatan amplifikasi dapat mencapai 2Kb/menit, yang sangat cocok untuk reaksi PCR Langsung.

Komponen produk:

Fitur & keuntungan:

- Tidak perlu pemurnian DNA yang memakan waktu dan mahal.

- Persyaratan sampel kecil, hanya 5 mg jaringan hewan yang dapat digunakan untuk eksperimen.

- Tidak diperlukan perlakuan khusus seperti penggilingan dan penghancuran, dan pengoperasiannya sederhana.

- Sistem PCR yang dioptimalkan membuat PCR lebih spesifik dan lebih tahan terhadap inhibitor reaksi PCR.

Aplikasi:

- Lingkup aplikasi: berbagai jaringan hewan.

- DNA yang dilepaskan dari lisis sampel: Gunakan hanya sebagai template PCR.

- Kit dapat digunakan untuk tujuan berikut: identifikasi transgen, genotipe hewan, dll.

Kontrol kualitas produk:

Menurut Total Quality Management System FOREGENE, setiap batch kit PCR langsung hewan diuji secara ketat beberapa kali untuk memastikan keandalan dan stabilitas kualitas setiap batch kit.

Informasi Komponen Kit

Buffer AL: Menyediakan lingkungan yang diperlukan untuk reaksi lisis jaringan hewan.

Foregene Protease: Melisiskan jaringan hewan dengan adanya buffer lisis untuk melepaskan DNA genom.

2×PCR EasyTM Mix: Mengandung D-Taq DNA Polymerase yang dimodifikasi khusus oleh Fuji Bio, dNTPs, MgCl2, buffer reaksi, penambah reaksi PCR, pengoptimal dan penstabil, dll. Untuk reaksi PCR, cukup tambahkan campuran lisis, primer, dan ddH2O yang sesuai ke 2xPCR EasyTM Mix untuk reaksi PCR.

6×DNA Loading Buffer: Loading Buffer ini tidak mengandung SDS.Direkomendasikan untuk menggunakan 6× DNA Loading Buffer yang disertakan dengan kit saat melakukan elektroforesis gel agarosa untuk mendapatkan hasil elektroforesis yang baik.Jangan gunakan Loading Buffer yang mengandung SDS, jika tidak akan ada ekor cahaya yang besar di jalur selama elektroforesis, yang akan mempengaruhi hasil eksperimen.

Kondisi penyimpanan

1. Kondisi Pengiriman

Seluruh proses diangkut dalam kotak es bersuhu rendah untuk memastikan bahwa Bagian I dan Bagian II kit berada dalam keadaan <4°C.

2. Kondisi penyimpanan

-Kit Bagian I ini disimpan pada suhu kamar atau 2-8℃.

-Reagen Buffer AL dapat disimpan selama 12 bulan dalam kondisi kering;untuk penyimpanan lebih lama, dapat disimpan pada 2-8°C.

Catatan: Jika disimpan pada suhu rendah, larutan ini rentan terhadap presipitasi.Pastikan untuk menempatkan larutan dalam kit pada suhu kamar selama beberapa waktu sebelum digunakan, dan jika perlu, panaskan terlebih dahulu dalam penangas air 37°C selama 10 menit untuk melarutkan endapan, dan aduk rata sebelum digunakan.

-Reagent Foregene Protease memiliki formula unik, untuk memastikan aktivitas dan stabilitasnya lebih baik, simpan di 4℃.

-Reagen 6×DNA Loading Buffer, dapat disimpan pada suhu 4°C atau -20°C untuk waktu yang lama.

Kit Bagian II ini disimpan pada suhu -20°C.

-Reagen 2×PCR Mudah^TMCampuran, jika sering digunakan, juga dapat disimpan pada suhu 4°C untuk waktu yang singkat (dibatasi untuk digunakan dalam 10 hari).

Tindakan pencegahan:(Pastikan untuk membaca tindakan pencegahan dengan seksama sebelum menggunakan kit)

- Perhatikan kebersihan peralatan laboratorium dan cara pengoperasian percobaan untuk menghindari kontaminasi silang antar sampel.

- Silakan coba menggunakan sampel jaringan hewan yang baru dikumpulkan untuk percobaan.Jika sampel jaringan disimpan untuk waktu yang lama, harap hindari pembekuan dan pencairan sampel berulang kali.

- Jika ada pengendapan di Buffer AL, dapat ditempatkan pada suhu 37°C sampai pengendapannya hilang, dan larutan dikocok sebelum digunakan.

- Foregene Protease memiliki formula yang unik, harap simpan di 4℃, jangan pernah -20℃.

- 2×PCR Mudah^TMCampuran harus menghindari pembekuan dan pencairan berulang, jika tidak maka akan mempengaruhi efisiensi PCR.

- Jika suhu sekitar terlalu tinggi, 2xPCR EasyTM Mix dapat menjadi keruh.Itu dapat ditempatkan di atas es selama 1-2 menit.Saat larutan bening, balikkan ke atas dan ke bawah sebanyak 3-5 kali sebelum digunakan.

- Jangan gunakan Loading Buffer yang mengandung SDS selama deteksi elektroforesis, jika tidak, sekelompok besar garis terang yang tertinggal akan muncul di jalur renang selama elektroforesis, yang akan mempengaruhi hasil eksperimen.

Reaksi kontrol PCR

Dalam analisis hasil PCR, apakah positif atau negatif, tanpa reaksi kontrol, kami tidak dapat memastikan bahwa hasilnya dapat diandalkan.Untuk memfasilitasi analisis hasil eksperimen selanjutnya, kami merekomendasikan pengaturan reaksi kontrol PCR positif dan negatif selama PCR untuk mengecualikan gangguan positif palsu atau negatif palsu.

A: Kontrol positif

Gunakan primer dari gen yang dikonservasi dalam sampel yang mudah untuk diamplifikasi dan gunakan DNA sampel yang dimurnikan sebagai template untuk melakukan reaksi kontrol positif untuk menentukan kebenaran sistem dan kondisi reaksi PCR serta efektivitas 2×PCR Easy_TMMencampur.Pembuatan sistem reaksi ditunjukkan pada Tabel 3 di bawah ini.

Tabel 3: Kontrol persiapan sistem reaksi PCR

1*: Primer dari gen yang dilestarikan yang lebih mudah untuk diamplifikasi dalam sampel ini dapat dipilih, seperti gen -Actin, sekuens yang dilestarikan dalam genom, dll. (pastikan ketersediaan primer ini).

2*: DNA yang dimurnikan dari sampel dapat dipilih, atau dapat dipilih sesuai dengan kebutuhan eksperimen.