Pengantar:
Molekul RNA dapat berinteraksi secara ekstensif dengan molekul biologis lainnya, seperti protein, DNA dan RNA, dan dengan demikian ada dalam sel dan organisme dalam bentuk kompleks makromolekul.Di antara mereka, kompleks RNA-protein adalah keberadaan dan fungsi RNA Salah satu bentuk penting dari.Penarikan RNA adalah metode klasik untuk menyaring dan mengidentifikasi molekul RNA, terutama protein yang berinteraksi dari molekul lncRNA, dan diakui oleh sebagian besar peneliti dan jurnal akademik otoritatif internasional.Hari ini FORREGENE akan berbagi dengan Anda prinsip eksperimental dan proses teknis RNA pull-down, mungkin Anda dapat menggunakannya
1. Prinsip eksperimental teknologi pull down RNA:
Transkripsi in vitro dan sintesis fragmen lncRNA atau lncRNA target berlabel biotin (termasuk fragmen RNA yang digunakan sebagai kontrol positif dan negatif), dan diinkubasi dengan ekstrak sel;gunakan manik-manik magnet berlabuh avidin untuk mengumpulkan kompleks RNA-protein atau RNA-RNA. Setelah pencucian menyeluruh, kompleks dielusi.Jika mendeteksi molekul target protein yang berinteraksi dengan lncRNA, lakukan elektroforesis protein pada produk pull-down RNA, deteksi protein target dengan pewarnaan perak, dan potong gel untuk spektrometri massa;juga langsung melakukan verifikasi western blot pada produk pull-down;jika terdeteksi Untuk molekul target RNA yang berinteraksi dengan lncRNA, produk RNA-pull down dikenai ekstraksi RNA dan deteksi qRT-PCR spesifik dilakukan.
2. Proses eksperimen teknologi pull down RNA:
Budaya sel
Persiapan ekstrak protein total sel/nuklear/plasma
Percobaan tarik-turun RNA
Elektroforesis SDS-PAGE, pewarnaan perak
Spektrometri massa dan eksperimen WB
Laporan eksperimental
Gambar berikut menunjukkan hasil RNA pull down FJ Bio-Bio dan deteksi elektroforesis SDS-PAGE, di mana panah merah menandai pita perbedaan:
Kelompok penelitian Profesor Song Xu dari Universitas Sichuan telah mengumpulkan 15 tahun akumulasi jangka panjang di bidang penelitian lncRNA.Foregene Bio dan kelompok riset Profesor Song Xu bekerja sama untuk meluncurkan teknologi RNA pull down lncRNA, yang akan memberi Anda hasil yang memuaskan untuk eksperimen Anda.
Kontak Person: inquiry
Tel: 0086 13880676215
Faks: 86-028-86050301