PCR Kuantitatif Fluoresensi

Saudara, transkripsi terbalik selesai, dan akhirnya langkah terakhir - PCR kuantitatif fluoresen!Hei, saudara, apa itu PCR kuantitatif waktu nyata?

PCR Anda selalu tahu, kan?

Anda tahu, PCR adalah reaksi berantai polimerase, dan itu adalah teknologi yang meningkatkan DNA!

Ini hampir... Ini adalah metode teknis untuk memperkuat urutan target hingga lebih dari satu juta kali melalui primer tertentu, tetapi ini hanya menunjukkan ada atau tidak adanya urutan target, dan tidak dapat menentukan jumlah template awal.PCR kuantitatif fluoresensi adalah metode teknis yang dikembangkan untuk mengatasi masalah ini.PCR waktu nyata dan PCR kuantitas (qPCR) umumnya merujuk padanya.

Perbedaan dari PCR biasa terletak pada kuantifikasi fluoresensi?

Ya, yaitu, pada tahap perpanjangan setiap siklus PCR, intensitas sinyal fluoresensi terdeteksi, dan jumlah template awal dapat dihitung sesuai dengan perubahan intensitas sinyal.

Rasanya sangat rumit!Apakah saya harus menghitungnya sendiri?

Ini menuntut Anda untuk belajar perlahan, yang terbaik adalah dapat memahami prinsipnya.Sekarang Anda dapat fokus pada nilai CT terlebih dahulu, yang merupakan data eksperimental yang relatif intuitif, dan ukurannya sesuai dengan ukuran jumlah template awal.Ada juga grafik seperti kurva amplifikasi dan kurva leleh.Mereka memiliki keputusan akhir tentang apakah eksperimen Anda berhasil atau tidak.

Oh, saudara.Lalu saya akan melakukan percobaan qPCR!

Berikan perhatian khusus untuk tidak menambahkan templat ke area reagen, jika tidak, campuran Anda yang tidak digunakan akan mudah terkontaminasi!

Mengerti!